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invitrogen反转录酶III SuperScript?,逆转录酶3

SuperScript III 反转录酶(RT) (SuperScript III Reverse Transcriptase (RT)) 是SuperScript II RT 的专有突变体，在50°C 具有活性，半衰期为220 分钟，使用基因特异性引物(GSP) 提高特异性，在所有RT 中cDNA 产量zui高。如果要进行特定基因的RT-PCR 或从总RNA 或poly (A)+ RNA 样品生成cDNA，该产物十分理想。和SuperScript II 一样，它可以从单链RNA、DNA 或RNA:DNA 杂合体合成互补DNA 链。通过引入点突变对SuperScript III RT 进行遗传改造，这些点突变可以增加半衰期、降低RNase 活性并增加热稳定性。进行结构修饰后： 

• 50°C 时半衰期为220 分钟，获得zui高的cDNA 产量（图1）
• RNase H 活性降低，获得更多全长cDNA
• 在50°C 有zui大活性，用GSP 增加特异性
• 能增加RT 单位而不抑制后续的PCR

invitrogen反转录酶III SuperScript?,逆转录酶3

性能和质量测试：SDS-PAGE 纯度；脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析（图2）及cDNA 产物的产量和长度。

单位定义：一个单位的SuperScript? III RT 是在37°C 的反应体系中，使用poly(A)?oligo(dT)12-18 作为模板?引物，在10 分钟内将1 纳摩尔脱氧核糖核苷酸掺入酸沉淀材料所需的酶量(3)。

单位反应条件：50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。0.5 更看更多mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)12-18、0.1 mg/ml BSA 和酶，共50 μl，温度37°C，时间10 分钟。 

?,逆转录酶3

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